糖原含量測試盒

微量法 100管/96樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

糖原是由葡萄糖單位構成的高分子多糖，是糖的主要的儲存形式之一，主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量，分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調節血糖濃度，當血糖升高時可在肝臟合成糖原，血糖降低時，肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此，肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時，肌糖原不能直接分解成血糖，必須先分解產生乳酸,隨血液循環到肝臟,通過糖異生轉變為肝糖原或葡萄糖。

測定原理：

蒽酮法。利用強堿性提取液提取糖原，在強酸性條件下利用蒽酮顯色劑測定糖原含量。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、濃硫酸（不允許快遞）和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：0.1mg/mL 的葡萄糖標準液 10mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶， 4℃保存；

糖原提?。?/p>

1﹑細胞或細菌：收集500~1000萬細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；加入0.75mL提取液超聲波破碎細菌或細胞（功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；轉移至10mL試管中，95℃水浴20min（蓋緊，防止水分散失），隔5min振搖試管1次，使充分混勻；取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到5ml，混勻，8000g 25℃離心10min，取上清液待測。

2﹑組織：稱取0.1~0.2g樣品，加入0.75ml提取液充分勻漿；轉移至10ml試管中；95℃水浴20min（蓋緊，防止水分散失），隔5min振搖試管1次，使充分混勻；待組織全部溶解后，取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到5ml，混勻，8000g 25℃離心10min，取上清液待測。

測定步驟

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長至620nm，蒸餾水調零。

2、調節水浴鍋至95℃。

3、試劑二工作液的配制：在試劑二中倒入6mL蒸餾水，緩慢倒入24mL濃硫酸，充分溶解混勻后使用；用不完的試劑4℃保存一周；

4、加樣表（在EP管中反應）：

混勻，置95℃水浴10min（蓋緊，防止水分散失），冷卻，取200μL轉移至微量石英比色皿或96孔板中，于620nm波長處，分別讀取空白管、標準管和測定管吸光度，分別記為A1、A2和A3。

注意：1、空白管和標準管只要測一次。

如果A3-A1大于2，需要將樣本用蒸餾水稀釋，計算公式中乘以相應稀釋倍數。

糖原含量的計算：

1、按照樣本質量計算

糖原（mg/mL）＝1.11×(C標準×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= 0.555×(A3-A1)÷（A2-A1)÷0.05

2、按照蛋白質含量計算

糖原(mg/mg prot)＝1.11×(C標準×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷（A2-A1) ÷Cpr

1.11：是此法測得葡萄糖含量換算為糖原含量的常數，即111ug糖原用蒽酮試劑顯色相當于100ug葡萄糖用蒽酮所試劑顯示的顏色；C標準管：標準管濃度，0.1mg/mL；V1：加入反應體系中待測樣本體積，0.06mL；V2：加入提取液體積，5mL； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。

注意：*低檢測限為10ng/g鮮重或0.1ng/ mg prot。

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國內試劑耗材經銷代理。

2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。

3. 提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。

4. 進出口貨物代理服務。

5. 公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質量保證，所有產品都提供售后服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式，為客戶全面解決實驗、生產、開發需求。公司整合國際與國內資源，加強網絡建設，提高公司內部運作效率，為客戶提供方便、快捷的服務。

7. 公司突出創新思維，提高工作效能，減低運作成本，為客戶提供優惠的價格。

糖原含量測試盒